Introducción

El lomboy rojo (Jatropha vernicosa) se ha usado para el tratamiento del dolor de dientes y la cicatrización de heridas y hemorroides (León de la Luz et al., 2014). En peces, se ha demostrado su potencial efecto inmunológico y antioxidante (Silva-Jara et al., 2020). En ese estudio, los autores demostraron que los extractos de corteza de tallo de lomboy rojo tenían compuestos antioxidantes, que no eran tóxicos para las células y que podrían estimular las defensas inmunes del jurel (Seriola rivoliana). En seguimiento a ese estudio, en el presente trabajo se planteó examinar in vitro, el potencial anti-inflamatorio de extractos del lomboy rojo en células de riñon cefálico del jurel. Jatropha vernicosa, se distribuye en el estado de Baja California Sur, México, particularmente en áreas montañosas de la Sierra de La Laguna y Sierra de La Giganta (León de la Luz et al., 2014). Los pobladores de estas áreas aprovechan el lomboy rojo como planta medicinal para diferentes problemas de salud. El Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C. (CIBNOR) cuenta con parcelas con cultivos de lomboy rojo para conservación e investigaciones futuras.

Objetivo

Determinar el potencial del lomboy rojo (extractos) como anti-inflamatorio, usando células de riñón cefálico del pez jurel de cultivo.

Materiales y métodos

El lomboy y la preparación de extractos. El tallo de lomboy rojo se colectó en La Paz, (23°55’10.9″N 110°11’46.4″W) Baja California Sur, México (15 de julio de 2019), y se secó a 40 °C durante 48 horas en un cuarto oscuro y ventilado. El extracto acuoso se preparó al 10% (p/v) con agua destilada en ebullición (100 °C) durante 5 min. Posteriormente, la infusión se clarificó por filtración en papel filtro (Whatman No.1), se concentró por ultrafiltración (Amicon Cell, membrana de tamaño de poro de 1000 Da) y se liofilizó (Labconco, Free zone 18L) para guardarse a -20 °C, hasta su uso.

Los peces y la obtención de células (leucocitos). Se usaron 3 jureles de2 kg de peso (empresa Kampashi Farm, La Paz, B.C.S., México). Se sacrificaron, para colectar el riñón cefálico, de acuerdo con la normatividad nacional para el manejo de animales (NOM-033-SAG/ZOO-2014). Luego, las células del riñon cefálico se separaron mediante un protocolo estandarizado en el laboratorio (Silva-Jara et al., 2020).

Lomboy rojo y las células de jurel. Los extractos de Lomboy (a concentración de 50, 150 y 300 µg/ml) más un proinflamatorio lipopolisacárido (LPS 10 ng) se añadieron a las células (un millón) del riñón cefálico e incubaron a 25 °C durante 24 horas. Pasado el tiempo se determinó la toxicidad, la actividad fagocítica, la producción de óxido nítrico y la expresión de genes pro-inflamatorios (IL-1β y TNF-α) y anti-inflamatorios (IL-10) del sistema de defensa de los peces.

Resultados y discusión

Los extractos de corteza de tallo de lomboy rojo no fueron tóxicos para las células del riñón cefálico, después de 24 horas de incubación (Figura 1), lo que indica que el lomboy rojo es seguro para el jurel. El extracto acuoso (té) disminuyó la actividad fagocítica y la producción de óxido nítrico de las células de jurel, previamente tratadas con el pro-inflamatorio LPS (Figura 2), lo que indica un efecto anti-inflamatorio del lomboy rojo. Este efecto se confirmó en las células mediante el análisis de expresión de genes (Figura 3). El nivel de expresión de genes pro-inflamatorios (IL-1β y TNF-α) fue más alto cuando sólo se usó LPS (el pro-inflamatorio) y disminuyó con la adición del extracto de lomboy rojo. Como se esperaba, la expresión del gen anti-inflamatorio (IL-10) aumentó con el extracto de lomboy rojo, aunque sólo ocurrió cuando se utilizó la concentración de 50 µg/mL. Estas evidencias indican que existe una dosis adecuada del extracto de lomboy rojo para obtener el efecto anti-inflamatorio y que los indicadores analizados pueden servir para medir este efecto.

Figura 1. Viabilidad de las células (leucocitos) de jurel (Seriola rivoliana) estimuladas con extracto acuoso de corteza de lomboy rojo (Jatropha vernicosa (Jv): 50, 150 y 300 μg/mL) y células (leucocitos = Leu) estimuladas con extracto acuoso de lomboy rojo y retados con LPS (10 ng). Leucocitos sin extracto, leucocitos con solución de fosfatos (PBS) y leucocitos incubados con dimetil sulfóxido (DMSO) fueron usados como controles. Diferentes letras indican diferencias estadísticas (p < 0.05).

Figura 2. Efecto del lomboy rojo (Jatropha vernicosa, Jv) sobre la fagocitosis y la producción de óxido nítrico en células (leucocitos) de jurel. Diferentes letras indican diferencias estadísticas (p < 0.05).

Conclusiones

Los extractos acuosos (infusión o té) de la corteza del tallo del lomboy rojo tuvieron un efecto anti-inflamatorio en células (leucocitos) del sistema de defensa del jurel, demostrado por (1) la disminución de parámetros pro-inflamatorios y (2) el cambio en la expresión de genes, principalmente a la concentración de 50 µg/ml. Por los resultados obtenidos, la incorporación del lomboy rojo en la dieta podría funcionar como un auxiliar anti-inflamatorio en el jurel durante su cultivo.

Figura 3. Efecto del lomboy rojo (Jatropha vernicosa, Jv) sobre la expresión de genes pro- (IL-1𝛽 y TNF-𝞪) y anti-inflamatorios (IL-10) en células de jurel. Diferentes letras indican diferencias estadísticas (p < 0.05).